微小RNA-138-5p与软骨细胞增殖和自噬的关系
作者：马泽涛,曾晖,王德利,翁鉴,冯松 单位：北京大学深圳医院骨关节科 本文刊于： 《中国组织工程研究》 2021年第05期
关键词:
RNA 骨关节炎 软骨细胞 自噬 通路 细胞增殖 基质金属蛋白酶Keywords
RNA, osteoarthritis, chondrocytes, autophagy, pathway, cell proliferation, matrix metalloproteinase
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摘要
背景:软骨细胞自噬活性的异常会导致软骨组织退行性病变,引发骨关节炎。近年的研究发现mircoRNA在调控软骨细胞自噬过程中发挥了重要的作用,但其作用的分子机制还不太清楚。目的:探究微小RNA-138-5p(miR-138-5p)对软骨细胞增殖和自噬活性的调节及其作用机制。方法:体外培养SW1353软骨肉瘤细胞系,对照组细胞转染阴性对照miRNA;实验组细胞转染miR-138-5p模拟物。CCK-8法检测细胞增殖活性,荧光定量PCR实验检测基质金属蛋白酶1,3,13的mRNA表达水平;免疫荧光染色法检测LC3蛋白亚细胞定位,用TargetScan7.1在线工具预测miR-138-5p与SIRT1信使RNA(mRNA)的作用位点,用蛋白质免疫印迹实验检测自噬相关蛋白和AMPK信号通路蛋白的表达水平。结果与结论:①与转染阴性对照的细胞相比,转染miR-138-5p模拟物的细胞增殖活性明显下降,细胞内LC3蛋白点状定位减少,且SIRT1、LC3-II、p-AMPK蛋白表达水平下调,p62蛋白表达水平上升,SIRT1 mRNA的3’UTR区域存在一个保守的miR-138-5p结合位点;②与转染对照miRNA的细胞相比,转染miR-138-5p模拟物的细胞中基质金属蛋白酶1,3和13的mRNA表达均有上升;③结果提示,miR-138-5p调控细胞自噬活性和细胞增殖,其作用机制与SIRT1/AMPK信号通路相关;细胞内上调表达的miR-138-5p会促进软骨细胞基质金属蛋白酶的分泌,表明miR-138-5p在骨关节炎疾病进展中发挥了重要的作用。
本文地址：www.fabiao.net/content-22-7315-1.html
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