两种月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞生物学特性的比较

本文刊于: 《中国组织工程研究》 2021年第0期

关键词:
干细胞 脂肪间充质干细胞 近交系五指山小型猪 年龄 增殖 分化 衰老

Keywords:
stem cells,adipose mesenchymal stem cells,inbred Wuzhishan miniature pig,age,proliferation,differentiation,senescence
摘要
     背景:干细胞是再生医学研究的热点,影响干细胞生物学特性的因素很多,其中供体年龄是重要的影响因素之一。目的:观察两种月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞生物学特性的变化,筛选最佳种子细胞来源。方法:以4月龄和12月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞为研究对象,分别选取第3代细胞和第10代细胞,观察细胞形态,绘制细胞增殖曲线,检测细胞表面抗原、细胞周期、细胞凋亡情况,然后进行成骨诱导分化茜素红染色和成脂诱导分化油红O染色以及细胞衰老β-半乳糖苷酶染色等。结果与结论:①4月龄和12月龄细胞均呈漩涡状贴壁生长,表面标志物CD29、CD44和CD90表达均为阳性,CD8a、CD45和HLA-DR表达均为阴性;②4月龄和12月龄第3代细胞增殖能力均较强;第10代细胞,与4月龄相比,12月龄G0/G1期百分比增高(P <0.001),早期凋亡增加(P <0.001),而S期和G2/M期百分比显著下降(P <0.001);③4月龄和12月龄第3代细胞的体外诱导分化能力无显著性差异;12月龄第10代细胞的钙化结节率和脂滴率与4月龄相比显著降低(P <0.001);④4月龄和12月龄第3代细胞β-半乳糖苷酶几乎不表达;12月龄第10代细胞β-半乳糖苷酶阳性细胞与4月龄相比显著增加(P <0.001),且细胞形态变得更加扁平和肥大、折光性弱;⑤结果表明,4月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞具有更强的增殖和分化能力,且细胞衰老活性更低,提示4月龄更适合用于自体移植的种子细胞。

基金项目:
海南省自然青年基金(819QN390),项目负责人:高元慧;海南省自然青年基金(819QN386),项目负责人:黄邓高;海南省重大科技计划项目(ZDKJ2017007),项目负责人:张淑芳~~

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