狼蛛毒素在胆红素诱导的耳神经毒性中作用的实验研究

本文刊于: 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 2021年第0期

关键词:
动物实验 胆红素 毛细胞 听觉 螺旋神经节 狼蛛毒素

Keywords:
Animal Experimentation,Bilirubin,Hair Cells,Auditory,Spiral Ganglion,psalmotoxin-1
摘要
     目的观察狼蛛毒素(psalmotoxin-1)对胆红素诱导的耳蜗组织毒性作用。方法新生3 d的SD大鼠,断头解剖获得耳蜗基底膜离体培养24 h,将耳蜗组织随机分5个组,对照组、50 μmol/L胆红素组、100 μmol/L胆红素组、100 ng/ml psalmotoxin-1组和100 μmol/L胆红素+100 ng/ml psalmotoxin-1组。实验组培养基按各分组浓度,加入相应胆红素和(或)psalmotoxin-1溶液,对照组加入相应体积生理盐水。所有耳蜗样本继续培养24 h后终止,进行组织固定和免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察,最后进行统计学分析。结果不同浓度胆红素作用后,50 μmol/L胆红素组基底膜螺旋神经节神经元细胞(spiral ganglion neurons,SGNs)开始出现不同程度减少,但耳蜗毛细胞(hair cells,HCs)形态及数量完整;100 μmol/L胆红素组耳蜗组织SGNs出现细胞体积明显缩小,伴随细胞核浓缩或碎裂,细胞数目明显减少,HCs出现不同程度损伤,SGNs数目与对照组比较,差异有统计学意义(t=18.89,P<0.0001)。100 ng/ml psalmotoxin-1组基底膜SGNs和HCs形态及数量较对照组均未出现明显改变(P均>0.05);100 μmol/L胆红素+100 ng/ml psalmotoxin-1组SGNs形态变化及数量减少较单纯100 μmol/L胆红素组明显减轻(t=21.63,P<0.0001)。结论在耳蜗器官培养中,胆红素以剂量依赖性方式损伤新生大鼠耳蜗SGNs和HCs;胆红素对耳蜗SGNs的损伤较HCs发生早,损伤程度重。在耳蜗器官培养中,psalmotoxin-1可减弱胆红素诱导的耳蜗毒性作用。

基金项目:
国家自然科学基金资助项目(81800919)

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