卡他莫拉菌UspA1蛋白多克隆抗体的制备及鉴定
作者：王辉;杨波;赵可胜;李家吉;李新;孔萌萌;宫春杰;王毅;陶冶;张秋;胡征 单位：湖北工业大学生物工程与食品学院发酵工程教育部重点实验室 2018年第01期
关键词:
卡他莫拉菌;UspA1蛋白;原核表达;多克隆抗体Keywords
Moraxella catarrhalis;UspA1;prokaryotic expression;polyclonal antibodies
摘要
为制备抗卡他莫拉菌(Moraxella catarrhalis,Mc)表面蛋白UspA1胞外结构域的多克隆抗体(PcAb),对UspA1蛋白进行生物信息学分析,获取胞外结构域中抗原表位最为丰富的肽段,找到其对应的基因序列并引入大肠杆菌偏好性密码子,对其优化后化学合成全基因序列。将该基因序列按常规方法克隆入表达载体p ET-28a(+)后表达重组UspA1-His融合蛋白并纯化。以该纯化抗原免疫新西兰大白兔,经4次免疫后,用Protein A亲和层析柱从抗血清中纯化出抗UspA1-His融合蛋白PcAbIgG。经免疫荧光法、酶联免疫吸附法及Western blotting鉴定,抗UspA1-His融合蛋白PcAb能特异性识别UspA1蛋白的表面暴露区。该多抗的制备为下一步建立卡他莫拉菌快速检测技术奠定了基础。
本文地址：www.fabiao.net/content-19-8277-1.html
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