神经胶质成熟因子γ抑制人结直肠癌LoVo细胞增殖并影响人脐静脉内皮细胞的骨架运动

本文刊于: 《中国组织工程研究》 2021年第0期

关键词:
人脐静脉内皮细胞 细胞骨架 LoVo细胞 细胞增殖 神经胶质成熟因子γ 秋水仙素

Keywords:
human umbilical vein endothelial cells,cytoskeleton,LoVo cells,cell proliferation,glia maturation factor-gamma,colchicine,colorectal cancer
摘要
     背景:神经胶质成熟因子γ(glia maturation factor-gamma,GMFG)是细胞骨架运动重建过程中ADF/cofilin超家族蛋白成员之一,可以通过调节肌动蛋白介导细胞骨架重组参与细胞运动的调控。作者前期发现GMFG的高表达与结直肠癌肿瘤患者临床病理相关,但具体的上游及下游机制有待探究。目的:探索GMFG对人脐静脉内皮细胞骨架及LoVo细胞增殖的影响。方法:(1)将人脐静脉内皮细胞接种在激光共聚焦皿中,待细胞贴壁稳定生长后,细胞免疫荧光染色观察GMFG的表达与人脐静脉内皮细胞骨架蛋白F-actin表达的关系;然后加入秋水仙素抑制细胞有丝分裂,分为对照组、0.5 mg/L秋水仙素组、1.0 mg/L秋水仙素组,流式细胞术观察3组细胞周期的变化,Western blot蛋白印迹观察3组细胞GMFG蛋白表达;(2)将人结直肠癌LoVo细胞接种在激光共聚焦皿中,待细胞贴壁稳定生长后,细胞免疫荧光染色观察GMFG的表达与细胞周期的相关性,然后采用siRNA技术干扰LoVo细胞中GMFG的表达,分为空白对照组、空转染组和siRNA-GMFG组,Edu实验检测细胞增殖率的变化。结果与结论:(1)在人脐静脉内皮细胞中,GMFG的表达与人脐静脉内皮细胞骨架运动有关,细胞骨架回缩时GMFG表达增多;秋水仙素抑制人脐静脉内皮细胞有丝分裂后,随秋水仙素用量增加G2/M期细胞占比增加,GMFG蛋白表达下降;(2)在LoVo细胞中,GMFG的表达强度与细胞有丝分裂有关,在细胞有丝分裂中后期GMFG表达增强;(3)siRNA技术干扰LoVo细胞GMFG表达后,细胞增殖率下降;(4)结果表明,干扰GMFG表达能够抑制人结直肠癌LoVo细胞的增殖率,并且细胞骨架运动与GMFG的表达存在一定的相关性。

基金项目:
2020年广东省医学科学技术研究基金项目(A2020599),项目负责人:王惠丽~~

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