同型半胱氨酸致足细胞凋亡中FoxO1 DNA甲基化水平增高
作者:刘昆,谢琳,曹军,丁宁,徐灵博,马胜超,李桂忠,姜怡邓,卢冠军 单位:宁夏医科大学临床医学院,国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,宁夏血管损伤与修复研究重点实验室,宁夏医科大学基础医学院,宁夏医科大学总医院 本文刊于: 《中国组织工程研究》 2021年第0期
关键词:
肾 肾小球 肾损伤 同型半胱氨酸 足细胞 凋亡 因子 甲基化Keywords:
kidney,glomerulus,renal injury,homocysteine,podocyte,apoptosis,factor,methylation
摘要
背景:同型半胱氨酸增多会引起肾损伤并导致足细胞凋亡,但是其具体机制还尚不清楚。目的:探讨叉头框转录因子O1 (forkhead box O,FoxO1)及其DNA甲基化在同型半胱氨酸致足细胞凋亡中的作用。方法:体外培养小鼠肾脏足细胞(MPC-5),将其分为对照组(0μmol/L同型半胱氨酸)和同型半胱氨酸组(80μmol/L同型半胱氨酸)。干预细胞48 h后,采用免疫荧光技术检验足细胞凋亡相关蛋白Bax、caspase12和Bcl-2的表达情况;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测FoxO1 mRNA水平;采用Western blot检测FoxO1和DNMT1蛋白表达水平;采用巢式降落式特异性PCR(nMS-PCR)测验Fox O1的DNA甲基化水平。结果与结论:①与对照组相比,同型半胱氨酸组足细胞中Bax和caspase12表达明显增高,Bcl-2表达明显降低;②FoxO1的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P <0.01);③与对照组相比,同型半胱氨酸组FoxO1 DNA甲基化水平明显升高(P <0.01),同型半胱氨酸组足细胞中DNMT1蛋白表达明显增高(P <0.01);④结果表明:FoxO1 DNA高甲基化在同型半胱氨酸致足细胞凋亡中作用显著,而DNMT1参与同型半胱氨酸诱导的足细胞凋亡过程。
基金项目:
国家自然科学基金(81560120),项目负责人:卢冠军~~